siRNA Transfection Reagent 是一款新型、性能稳定的 siRNA 专用转染试剂,它具有较强的压缩 RNA 的能力,能够把 RNA 高效率、迅速地转染到真核细胞之中,而不被核酸酶降解。与其他转染试剂相比,具有毒性低、稳定性好、耐血清能力强、转染简单易行、重复性好等优点。
本产品可适用于众多原代培养和转化细胞株的 siRNA 转染。沉默效率高且性能稳定,在有无血清存在的细胞培养基中均能获得非常理想的基因沉默效果。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
名称
编号
规格
保存温度
siRNA Transfection Reagent
K00188-1/2
0.5ML/1ML
4度
自备材料:
1、胰蛋白酶消化液、完全培养液和不完全培养液、PBS
操作步骤(仅供参考):
以 24 孔板为例,进行质粒 siRNA 转染。
1、细胞接种:每孔接种 0.5~1.0x10⁵个细胞,细胞培养 12~24 小时,使转染时细胞密度达到 60~70%融合度。
2、稀释 siRNA:将 15pmol 的 siRNA 加入到 Opti-MEM 培养基中,稀释后的终体积为10μL。
3、稀释转染试剂:取 1uL 的 siRNA Transfection Reagent 加入到 9μL 的Opti-MEM 培养基中,稀释后的终体积为 10uL。4、复合物制备:将 siRNA 稀释液和转染试剂稀释液混合,轻轻吹打均匀后,室温静置 10 分钟。5、将上述 20mL 复合物加入到 24 孔板中,轻轻吹打混匀,继续培养 18~48 小时后检测转染效率,无需更换培养基。
不同细胞器皿转染时培养液、siRNA、转染试剂用量表
培养板
单孔面积
培养基体积
转染试剂体积
siRNA
培养基稀释后总体积
96 孔板
0.3 cm²
200μL
0.4μL
7.5pmol
10uL
24 孔板
2.0 cm²
500μL
1.0μL
15pmol
20uL
12 孔板
4.0 cm²
1mL
2.0μL
30pmol
40ul
6 孔板
10.0cm²
2mL
4.0μL
60pmol
100μL
6cm
20.0cm²
8.0uL
120pmol
10cm
60.0cm²
15mL
24.0uL
360pmol
600μL
注意事项:
1、 注意无菌操作,尽量避免污染。
2、 可通过改变细胞密度、siRNA 浓度以及 siRNA Transfection Reagent 浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,siRNA Transfection Reagent(uL):siRNA(pmol)可以在 0.02:1~0.15:1 之间调整。为了获得最佳的转染效果,不同的细胞类型和培养条件有所不同,可在上述推荐范围内自行优化转染条件。
3、试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12 个月有效;室温运输,4℃保存。
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。 2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。 3.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。